建议使用一个供体载体进行一次BP反应以获得一个入门克隆。然后将这一入门克隆和目的载体进行一次LR反应以获得新的表达克隆。
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可以使用BP Clonase酶和LR Clonase酶替代BP Clonase II 酶LR Clonase II酶进行BP/LR Clonase反应的一步法实验方案吗? 产品常问问题
在BP/LR Clonase反应的一步法实验方案中,不建议用BP Clonase酶和LR Clonase酶替代BP Clonase II 酶/LR Clonase II酶,因为这样的重组效率非常低。
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5X LR Clonase缓冲液或5X BP Clonase缓冲液不作为单独产品出售。它们作为酶试剂盒的一部分进行销售。
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我们可提供pYES-DEST52(货号12286019),它是唯一一种Gateway兼容的酵母表达载体。该载体专为在Saccharomyces cerevisia中实现高水平的半乳糖诱导型表达而设计。
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Excluding any amino acids resulting from fusion tags, CAT has an apparent molecular weight of 28-32 kD on SDS-PAGE gels.
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MultiSite Gateway Pro 2.0, 3.0, 和4.0试剂盒已于015年12月31日停产。替代产品是多位点Gateway Pro Plus试剂盒,货号12537100,可用于克隆多达4个DNA片段。
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Do the Gateway vectors pDEST14, pDEST15, pDEST17, and pDEST24 contain transcription terminators? 产品常问问题
Yes, all T7 DEST Vectors carry T7 transcription termination sequences downstream of the attR2 site.
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虽然顺次进行的BP和LR反应在菌落计数方面将为您提供最高的效率,但我们的研发人员已经开发了一个一步法BP/LR克隆酶反应的操作方法,该操作方法允许在一个试管中同时进行BP和LR反应。我们建议这种单步BP/LR克隆酶反应用于中等大小的单个插入,以节省时间。对于大的插入片段或多位点Gateway克隆,我们建议仍使用标准的两步操作。下面是这个一步法BP/LR克隆酶反应方法和操作步骤的里链接:
http://www.biotechniques.com/BiotechniquesJournal/2013/November/Single-step-BPLR-combined-Gateway-reactions/biotechniques-348086.html https://www.thermofisher.com/content/dam/LifeTech/migration/en/filelibrary/cloning/pdfs.par.1129.file.dat/Liang%20et%20al.%20Protocol%20revised.pdf
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Yes, we have come up with a single-step protocol for BP/LR Clonase reaction (http://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cloning/gateway-cloning.html#1), where DNA fragments can be cloned into Destination vectors in a single step reaction, allowing you to save time and money.
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